Bacterias, infección bacteriana y antibiograma.

Son Microorganismos procariotas, unicelulares, de tamaño microscópico (del orden de los micrones) y sus principales caracteristicas son:

· Están contenidas en una Pared Celular
· Poseen ambos tipos de ácidos nucleicos (ADN y ARN)
· Se multiplican por fisión binaria (tipo de reproducción asexual, donde la replicación es lineal, comenzando en un extremo de la cadena de ADN y terminando en el otro, decimos que es semiconservadora ya que c/u de las cadenas complementarias sirven de molde para la síntesis de otra).

Tipos
a. Aerobias o Anaerobias
b. Móviles o Inmóviles
c. Patógenas (causan enfermedades en el organismo al que invaden) o Saprofitas (es decir, viven libres en la naturaleza, se nutren de materia inorgánica u orgánica, siendo responsables de la transformación de la materia orgánica en mineral y de los ciclos del N y del C en la naturaleza).

Estructura bacteriana l

1.- PARED CELULAR :
Es una estructura gruesa y rígida presente en casi todas las especies bacterianas dando forma a la bacteria; se halla separada de la Memb. Citoplasmática por el Espacio Periplasmático (este espacio virtual es más manifiesto en las bacterias Gram – , y, allí encontramos:
- proteínas,
- enzimas como la fosfatasa alcalina y ácida,
- desoxiribonucleasas,
- ribonucleasas
- penicilinazas.
Se pone en evidencia utilizando la Tinción de Gram (la que permite distinguir bacterias Gram - , bacterias Gram + y bacterias sin pared (género Micoplasma y formas L – Bacterianas) o bien utilizando tinción de Ziehl Neelsen podemos observarla en el caso de los bacilos Acido Alcohol Resistentes (BAAR).

-Composición : Su principal componente es el Péptidoglicano o Mureína (en el caso de las Gram : N- Acetilglucosamina + N – Acetilmurámico; y en el caso de las BAAR : N – Acetilglucosamina + N – Glicosil murámico)
- Propiedades y Funciones:
1= Brinda protección y resistencia a la bacteria frente a los posibles cambios de presión osmótica del medio en el que se encuentra y a la acción de ciertos agentes externos.
2= Presenta Poros que actúan como filtros, permitiendo el pasaje de agua y metabolitos esenciales.
3= Presenta antígenos de tipo y grupo específicos.
4= Participa en la división (multiplicación) bacteriana (se invagina junto con la membrana plasmática)
5= En las bacterias Gram – tiene poder patógeno debido a que presenta endotoxinas (Lípido A).
6= Es el sustrato donde actúan los b - Lactámicos y otros antimicrobianos.
7= Resulta ser el fundamento del método de Gram
· Síntesis de la Pared : Los precursores son sintetizados en el citoplasma bacteriano, luego son transportados a través de la MP, se forma y elonga un polímero lineal y finalmente se establecen puentes de unión entre los polímeros constitutivos. La síntesis de la pared es inhibida por los b - Lactámicos.

2.- MEMBRANA CITOPLASMÁTICA (MP):
Es una bicapa lipídica sin esteroles, que presenta inclusiones de proteínas y glicolípidos que forman poros.
También presenta enzimas , bajo control cromosómico, como Fosfatasa alcalina, Hidrolasas, Penicilinasas.
Su cara externa presenta la proteína fijadora de penicilina (dicha proteína interviene en la formación del peptidoglicano o mureína y funciona como sitio diana para la acción de los b - Lactámicos); su cara interna se relaciona con el ARNm, Ribosomas y el Nucleoide.

·Propiedades y Funciones :
1 – Actúa como una activa y selectiva barrera osmótica
2 – Participa en la síntesis de la pared celular y la cápsula
3 – Realiza síntesis de ATP
4 – Es el sustrato donde actúan ATB como la Polimixina B (que alteran su permeabilidad)
En las bacterias Gram + podemos distinguir repliegues de la MP, denominados Mesosomas:
- Mesosomas Septales = Estos repliegues participan en la división celular.
- Mesosomas Laterales = participan en funciones de secreción.

3.- CITOPLOASMA :
Es una masa coloidal constituida por agua (85 %), minerales y fermentos.
No contiene sistemas membranosos (organelas).
Presenta un aspecto granuloso, distinguiéndose :
a.- Granulaciones mayores o microscópicas : Son vacuolas que almacenan sustancias de reserva, glucógeno, líquidos o gases.
b. Granulaciones Submicroscópicas : Son ribosomas.

4.- RIBOSOMAS :
Son gránulos de unos200 A de diámetro, ricos en ARN y proteínas.
Poseen un coeficiente de sedimentación de 70s (30s – 50s).
Su función es realizar la síntesis de proteínas.
Son el sitio diana donde actúan varios antimicrobianos como los
- Aminoglucósidos,
- Tetraciclinas,
- Cloramfenicol,
- Macrólidos
- Lincosaminas (inhiben la síntesis protéica de la bacteria).

5.- NUCLEOIDE : (ADN CROMOSÓMICO)
Consiste en un único cromosoma (filamento de ADN) que se encuentra apelotonado (en su estructura en doble hélice no presenta puentes de histonas). En algunos puntos entra en relación con la MP o con sus Mesosomas.

1. Confiere a la bacteria sus peculiaridades genéticas.
2. Interviene en el mecanismo de transferencia hereditaria.
3. Regula la Síntesis Protéica.
4. Induce los cambios que llevan a la división celular
5. Es el sitio de acción donde actúan antibióticos como las Quinolonas (Ac. Nalidixico, Norfloxacina,etc) , la Rifampicina y el Metroidazol.

Tipo de Replicación :
La replicación es lineal, comenzando en un extremo y terminando en el otro.
El ADN Cromosómico se autoreproduce por un mecanismo semiconservador , donde la cadena complementaria se separa y sirve de molde para la síntesis de otra cadena.

A.- GLUCOCÁLIX
Es una delgada capa externa compuesta por Polisacáridos (Levano o Dextrano) que facilitan la adherencia de la bacteria.

B.- FLAGELO
Se trata de una estructura helicoidal que se comporta como órgano locomotor de la bacteria, además presenta el Ag H (específico de tipo) que es el responsable de la aglutinación flagelar.

C.- FIMBRIAS O PILIS
Se trata de estructuras filamentosas carentes de movilidad, constituidas por una proteína llamada Pilina.
Por lo general están presentes en las bacterias Gram – , mientras que en las bacterias Gram + sólo se describen en el Corinebacterium Renale y algunos Streptococos.
Propiedades y Funciones :

- Propiedad Antigénica
- Brindan Adherencia : ya sea a superficies de látex , hematíes y/o al glucocálix de las células epiteliales.
- Algunos tipos de Pilis (F e I) intervienen en la transferencia de material genético por conjugación.
- Pili F = Filamento Sexual, largo , responsable de transmisión hereditaria
- Pili I = Filamento corto, responsable de la transmisión del factor Col (productor de bacteriocinas)

D.- CAPSULA
Estructura compleja, de grosor variable que rodea a una o más bacterias.
Puede estar presente tanto en bacterias Gram – como Gram +.
- Composición : Agua (90%)
- Polímeros orgánicos (en el género Bacillus : polisacáridos y polipéptidos)

Propiedades y Funciones :
1. Propiedad Antifagocitaria :
Dificulta o impide la fagocitosis, lo cual potencia su virulencia ya que favorece la multiplicación y facilita la invasión
2. Brinda Protección frente a Fagos y ATB : Dificulta la fijación de bacteriófagos e impide el pasaje de ATB que puedan afectar a la bacteria.
3. Propiedades Antigénicas :
· Induce la producción de anticuerpos protectores (esto es útil en la producción de algunas vacunas)
· Permite la diferenciación de tipos serológicos dentro de la misma especie ya sea por aglutinación con sueros tipo o por el fenómeno de vitrifacción o de Quellung (hinchazón de la cápsula) .


E.- ESPOROS
Son elementos de reproducción y/o de resistencia a un medio adverso que presentan algunas bacterias , especialmente del género bacilar.
Su forma, tamaño y ubicación varía según la especie.
Tipos :
· Endosporas
Espora presente en el interior de la bacteria. Destinada a germinar originando la forma vegetativa de la que deriva.
· Exosporas
Esporo que permanece libre en el ambiente, constituyendo la forma de resistencia bacteriana ante condiciones adversas o desfavorables (nutrición, desecación, temperatura, presencia de agentes químicos, presiones, etc.)

- Son resistentes al calor, a la desecación, a las presiones, a los agentes químicos, a los rayos U.V. y radiaciones ionizantes.
- Mantienen la virulencia de la forma vegetativa de la que derivan.
- Tiene un muy bajo metabolismo, que les permite permanecer viables por períodos tiempo indefinidos.
- Tiene propiedades inmunogénicas.

Germinación
ESPORO Condiciones del Medio FORMA VEGETATIVA
Esporulación

F.- PLASMIDOS (ADN EXTRACROMOSOMICO)
Se trata de una estructura esférica, que codifica independiente del nucleoide y que contiene información genética para sintetizar sustancias que no son indispensables para la bacteria.
El ADN extracromosómico se transmite por herencia a las bacterias hijas conjugación a otras bacterias (no hijas).

-Los Plásmidos se clasifican por los caracteres que expresan y se designan según esas propiedades:
· Plásmido "Ent" : Codifica la síntesis de enterotoxinas.
· Plásmido "Inv" : Da a las bacterias enteroinvasivas la capacidad de penetración a las células epiteliales del intestino.
· Plásmido "K" : Codifica la Producción de los Ag de superficie de la Escherichia Coli.
· Plásmido "Hly" : Codifica la producción de a - Hemolisina, responsable de la lisis de hematíes
· Factor F (sexual) : Son plásmidos autotransferibles, responsables de la transferencia de genes por conjugación que codifican la producción de pilis sexuales o F.
· Factor Col : codifican la producción de bacteriocinas (compuestos similares a los ATB) que resultan letales para otras bacterias .
· Factor R (de resistencia) : Es un plásmido, presente en ciertas bacterias Gram – , que codifica los mecanismos de resistencia a uno o más ATB.

MECANISMOS DE LA ACCION PATÓGENA :

COLONIZACIÓN
Es la capacidad de llegar a la superficie del huésped por una puerta de entrada (piel o mucosas), formar o establecer una colonia en el epitelio y resistir la acción de los sistemas locales de defensa .
Se entiende por colonia bacteriana a la agrupación de bacterias originadas a partir de una bacteria madre que se establecen y extienden por determinado medio.
Las bacterias patógenas pueden proceder :
· Del Exterior = llegan al organismo por una puerta de entrada causando infecciones exógenas.
· Del Propio Organismo = son bacterias oportunistas, que integraban la población de la flora normal, y que por determinados factores alcanzaron la capacidad de producir infecciones endógenas.
En cualquier caso , para iniciar la infección, los microorganismos deben fijarse o adherirse a las células y colonizar el epitelio.

PENETRACIÓN
Se denomina así a la capacidad de las bacterias para atravesar la barrera cutáneo – mucosa, alcanzar los tejidos subyacentes y ponerse en contacto con el medio interno del huésped, manifestando su acción patógena.

Respecto a este punto, podemos decir que existen :

A. Ejemplos (Bordetella Pertusi, Vibrio Cholerae; Corinebacterium Diphtheriae)
B. Bacterias Sin poder de Penetración : Estas bacterias No Precisan atravesar el epitelio para Expresar su Acción Patógena. Estas se adhieren, se multiplican, colonizan el epitelio donde liberan una exotoxina soluble que al ser absorbida en la mucosa puede ejercer o una acción local o general.
a través del epitelio intacto, heridas, quemaduras, catéteres, etc.: las bacterias atraviesan un epitelio que presente alteraciones anatómicas y funcionales.
C. Bacterias con capacidad de Penetración Pasiva : Estas bacterias atraviesan pasivamente el epitelio, ya sea mediante un vector de transmisión (artrópodos y otros insectos) las bacterias son inoculadas.
D. Bacterias con Capacidad de Penetración Activa : Estas bacterias penetran activamente el epitelio, mediante endocitosis realizada por la célula huésped.
Ej. Escherichia Coli, Shigella, etc.

MULTIPLICACIÓN E INVACION
- Multiplicación:
Hace referencia a la capacidad de reproducirse y alcanzar un Nº crítico que les permita para invadir y desarrollar su acción patógena, sorteando los mecanismos defensivos del huésped.
Para ello necesitan obtener del organismo los elementos nutritivos, necesarios para su crecimiento y reproducción; cuando no los encuentran, no pueden multiplicarse y por ende no pueden desarrollar la infección o ésta es controlada con mayor facilidad en un lapso de tiempo breve.
·Invasión:
Es la Capacidad de favorecer la difusión de la infección bacteriana en el organismo (ésta se debe a la producción de algunos metabolitos, enzimas y otras sustancias) ya sea interfiriendo los mecanismos defensivos del huésped o facilitando la penetración del microorganismo.
· Los factores que favorecen la Invasión en su mayoría son enzimas hidrolíticas que actúan sobre :
a.- Células y tejidos : Colagenazas, Hialuronidasa (Staphylococo Aureus, Streptococo Pyogenes, etc.)
b.- Desdoblamiento de:
- Proteínas (por parte de proteasas)
- Mucina (Mucinasas)
- Lípidos (lipasas)
- Ac. Nucléicos (Nucleassa)
c.- Proceso de Coagulación Coagulasa (transforma fibrinógeno en fibrina)
Ej. : Staphylococo Aureus
Quinasa (Transforma plasminógeno en plasmina)
Ej. : Streptococo Pyogenes, Staphylococo Aureus.

· CAPACIDAD LESIONAL
Es aquella capaz de producir alteraciones y/o lesiones en las células y tejidos del huésped, responsables del cuadro patológico.
Estas alteraciones pueden ser producidas por acción directa (presencia de Antígenos capsulares, somáticos o flagelares) o por mecanismos de acción Indirectos (producción de Sust. Tóxicas para las células huéspedes), lo cuales producen un proceso inflamatorio y ponen en marcha mecanismos inmunológicos responsables del cuadro clínico.

Factores Intervinientes:

1. ACCION TOXICA : Determinada por la producción de:
- Exotoxinas y/o Endotoxinas que son sustancias de naturaleza proteica que se liberan de forma directa o a través de vesículas, sin que se produzca lisis bacteriana.
Frecuentemente están codificadas por plásmidos o fagos; a veces consisten en 2 o más subunidades (una de las cuales sirve para adherirse y entrar a la cél. huésped , mientras que otra activa o inhibe determinada función celular). Tiene una acción Específica y las podemos clasificar en Neurotoxinas (toxina : diftérica, tetánica, botulínica, etc) y
- Enterotoxinas.(toxina de : Bordetella Pertusis, Clostridium Perfringes, Clostridium Difficile, Shigella Dysenteriae, etc.).
Algunas toxinas al ser inactivadas (con formaldehído)no alteran su antigenicidad, y los toxoides resultantes proporcionan algunas de las vacunas más eficaces (Ej. Toxoide tetánico y toxoide diftérico)
- Endotoxinas
Son sustancia de naturaleza lipopolisacárida, localizadas en la superficie celular del microorganismo y que son liberadas por lisis bacteriana. Son producidas principalmente por las bacterias Gram – de los géneros Escherichia, Salmonella, Shigella y Klebsiella. Los lipopolisacáridos (LPS)estimulan una gran variedad de respuestas por parte del huésped. Desde el punto de vista clínico, los efectos más importantes de los LPS son la fiebre y el colapso vascular o shock. La fiebre, actualmente se atribuye a la acción de citoquinas sobre el hipotálamo (principalmente la IL-1 y el factor tumoral o TNF) y puede beneficiar al huésped, al microorganismo o a ambos . En respuesta a los LPS, los macrófagos son quienes producen estsas2 citoquinas. El shock por Endotoxinas (shock séptico) se suele asociar con la diseminación sistémica del microorganismo y, el ejemplo más común es las septicemia por bacterias Gram - como Escherichia Coli, Nesisseria meningitidis, etc.

1. MECANISMOS INFLAMATORIOS :
Ya sea por mecanismos de acción directa o indirecta, las bacterias ponen en marcha el proceso inflamatorio; permitiendo que lleguen al foco inflamatorio los Fagocitos.
Si el microorganismo fuere capaz de producir la destrucción de los Fagocitos, la liberación de enzimas lisosómicas desde estos últimos, ampliarán aún más la reacción inflamatoria y llevando a alteraciones patológicas como la formación de granulomas.
2. MECANISMOS INMUNOLÓGICOS :
Las alteraciones patológicas también pueden deberse a fenómenos de hipersensibilidad.
La simple Rta. Inmune ya representa la producción de una serie de reacciones como vasodilatación, edema, hiperplasia ganglionar, infiltración celular, etc.; estas en condiciones normales apenas influyen en el cuadro clínico , pero si se produce un fenómeno de hipersensibilidad (respuesta inmune exagerada) el mismo puede ser el responsable de procesos patológicos graves o incluso causales de muerte.

FACTORES DETERMINANTES DE LA ACCIÓN PATÓGENA :
Son la Adherencia, la Acción Tóxica y otros componentes bacterianos :
·ADHERENCIA = Es el factor más importante en el momento de la colonización. Se lleva a cabo mediante la utilización de adhesinas que interactúan con los receptores superficiales de la célula huésped.
· OTROS COMPONENTES BACTERIANOS = Como por ejemplo los antígenos flagelares, capsulares, de pared o somáticos; que son capaces de favorecer la Respuesta Inmune.

FACTORES DE VIRULENCIA :
·
FERMENTOS
Son enzimas como Mucinasas, Glicosidasas o Neuraminidasas que descomponen las proteínas del moco, facilitando l penetración.
· FACTORES DE SUPERFICIE
Como la Cápsula y/o los Antígenos de Pared que inhiben la fagocitosis y la acción de sustancias bactericidas de la mucosa.
· PROTEASAS Ig A
Es una Enzima proteolítica que descompone la Ig A (subclase 1) desactivando el sistema local de defensa de la mucosa. La sintetizan microorganismos como Neisseria Meningitidis, Neisseria Gonorrhoeae, Streptococo Pneumaoniae y Haempophylus Influenzae, etc.
· BACTERIOCINAS
Son sustancias que actúan como antibióticos frente a otras bacterias , lo que les permite competir con bacterias integrantes de la flora normal microbiana del huésped.

CLASIFICACION DE LAS BACTERIAS
Se basa en la afinidad o no por la tinción de Gram, su morfología y en la utilización o no de O2 en su metabolismo, las bacterias son divididas en 3 grandes grupos : Gram - , Gram + y aquellas que no se tiñen con Gram (ej. Las BAAR); a su vez estos grupos pueden estar conformados por bacterias Aerobias o Anaerobias facultativas y bacterias Anaerobias Estrictas.
Ver a continuación un Esquema de Clasificación de las bacterias :

BACTERIAS AEROBIAS O ANAEROBIAS FACULTATIVAS
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BACTERIAS ANAEROBIAS ESTRICTAS
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BACTERIAS QUE NO SE TIÑEN CON GRAM
A. MYCOPLASMAS : No tienen Pared
B. MICOBACTERIUM (TUBERCULOSO Y LEPRAE) : Son BAAR (bacilos ácido alcohol resistentes), se tiñen con Ziehl Neelsen. No pedir Cultivo
C. ESPIRILOS (TREPONEMA PALIDUM) : es una espiroqueta, que se tiñe con Giemsa o impregnación Argéntica; visibles a la microscopía de campo oscuro o de contraste de fase. No pedir Cultivo
D. CHLAMIDEAS (PNEUMONIAE Y TRACHOMATIS) : Son de Parásitos Intracelular Obligados

INFECCIÓN BACTERIANA
Es la entrada, establecimiento y multiplicación de bacterias en la superficie o interior del huésped que va asociada a una Respuesta específica ; pudiendo o no ser acompañada de manifestaciones clínicas.

- COLONIZACIÓN BACTERIANA
Capacidad de las bacterias para establecerse y multiplicarse en la piel y/o mucosas del huésped en cantidades suficientes que permitan mantener un cierto número poblacional; sin que su presencia establezca o determine Respuestas clínicas ni inmunológicas.
- INFECCIÓN INAPARENTE o SUBCLÍNICA (ASINTOMÁTICA) :
Es aquel establecimiento de bacterias , que si bien induce una respuesta orgánica específica, no va seguida de manifestaciones clínicas.
Esto se debe a que hay un escaso Nº de Bacterias, a que éstas son poco virulentas o a que el huésped presenta un normal funcionamiento de sus defensas.
- ENFERMEDAD INFECCIOSA : Son aquellas enfermedades causadas por múltiples agentes patógenos(bacterias, virus, hongos y parásitos).
Dichos agentes interactúan con el organismo humano de diferentes maneras, resultando así una relación que está dada por :
Para ver el gráfico seleccione la opción "Descargar" del menú superior
Las enfermedades infecciosas se produce cuando tras el establecimiento de las bacterias surgen alteraciones y/o manifestaciones clínicas.
Esto se debe a que hay un gran Nº de Bacterias, a que estas son muy virulentas o a que determinadas circunstancias produjeron una depresión de los mecanismos defensivos del huésped, lo que interfiere con la Respuesta Inmunitaria.
· PATOGENICIDAD O PODER PATÓGENO
Es la capacidad de producir daño o enfermedad por parte de una determinada especie de microorganismo.
El poder patógeno no solo depende de la especie de microorganismo sino también de las características del huésped:
Nº de Bacterias + Virulencia (Mecanismos de Acción Patógena y factores de virulencia)

Enfermedad
Grado de Resistencia Organica (Grado de Resist. Específica e Inespecífica del Huésped)
· VIRULENCIA
Es el mayor o menor grado de Patogenicidad que posee un microorganismo.
Hace referencia a la cepa de determinado microorganismo.

CONCEPTO DE FLORA BACTERIANA NORMAL :
Es la población de microorganismos que residen en piel y/o mucosas de las personas sanas.
Tales microorganismos en su mayoría son bacterias, hongos, virus y parásitos.
La composición de la FN es variable y depende de factores como las características zonales del organismo, la edad, el sexo, su alimentación, la higiene personal, el clima, las condiciones socioeconómicas de la población y el grado de saneamiento ambiental.
Respecto a las características zonales del organismo, diremos que estas difieren según :
· Condiciones físico – químicas (humedad Temperatura y pH)
· Potencial de oxidoreducción
· Condiciones nutritivas (cantidad y calidad de nutrientes)
· Presencia de receptores específicos en la MP de las células huéspedes.
· Presencia de Sust. Inhibidoras (Lisozimas, Bacteriocinas, Ac. Grasos no saturados, Ig A secretoria)

Cabe destacar que los microorganismos están ampliamente distribuidos en la naturaleza, por ello el hombre se encuentra expuesto constantemente a los mismos desde su nacimiento (en el pasaje por el canal vaginal) y luego por contacto y exposición.
El hombre presenta zonas potenciales de colonización que reúnen las condiciones fisico- químicas, nutricionales, etc. que pueden resultar adecuadas o no para la supervivencia y multiplicación de diversas especies de microorganismos.

· IMPORTANCIA DE LA FLORA NORMAL
1. Sirve como Barrera frente a microorganismos patógenos u oportunistas
2. En el tubo digestivo es beneficiosa para la digestión de productos no atacables por los fermentos digestivos del sujeto, así como también contribuyen a la síntesis de algunas vitaminas como la vit. K

CONCEPTO DE BACTERIOFAGO o FAGO :
Virus cuyo huésped natural son las bacterias, en las que se reproducen.
En algunas especies bacterianas los Fagos juegan un papel importante en la trasmisión de información genética de una bacteria a otra, pudiendo (mediante trasducción) ser los encargados de trasmitir factores de resistencia a los antibióticos, como ocurre con los Staphylococos.
En otros casos el ingreso de un fago a una bacteria determina que el genoma viral se integre al de la bacteria, de tal forma que los genes parasitados por el fago pueden determinar que se expresen nuevos caracteres en el fenotipo (Lisogenia por fagoconversión); así el Corinebacterium Diphtheriae sólo será patógeno ( por lo tanto toxigénico) cuando se halle parasitado por un fago.

AGENTES ANTIMICROBIANOS (ANTIBIÓTICOS O ATB)
Pueden ser Bactericidas o Bacteriostáticos
1. Bactericidas : ATB con capacidad para destruir microorganismos sensibles o susceptibles, sin que medie la participación de las defensas humorales o celulares del huésped.
2. Bacteriostáticos : ATBG que inhiben de forma reversible los procesos metabólicos esenciales de cierta bacteria.

Origen de Agentes Microbianos :

· ATB Verdaderos : Son sustancias de origen biológico como por ej. las penicilinas, quienes derivan de un hongo del género penicillium.
· Quimioterápicos verdaderos : Son sustancias que derivan de síntesis química, como por ej. las sulfamidas, las cuales surgieron de los estudios realizados sobre las anilinas.
· Agentes Antimicrobianos Nuevos : Son Sustancias obtenidas por manipulación molecular de ATB verdaderos y/o Quimioterápicos verdaderos, con el fin de ampliar sus espectros de acción sobre microorganismos o bien para mejorar sus características farmacológicas.

RESISTENCIA BACTERIANA A LOS ATB :
Debido al uso excesivo, inadecuado, frecuente e irracional de los ATB, las bacterias las bacterias se volvieron más resistentes a ellos; esto contribuyó a la selección de especies resistentes y a la aparición de microorganismos multiresistentes, que ante el vacío ecológico creado por el mal uso de ATB, encuentran condiciones favorables para la multiplicación y proliferación
Los diferentes tipos de resistencia son :

- Resistencia Natural
- Resistencia Secundaria
- Resistencia Mutacional
- Resistencia Transferible

SUSCEPTIBILIDAD DE LAS BACTERIAS A LOS ATB :
Cuando la resistencia bacteriana comenzó a ser un fenómeno frecuente (debido al mal uso de los ATB) adquirió gran importancia el empleo de pruebas de sensibilidad antimicrobianas, ya que estas nos permiten determinar la respuesta a ellos por parte de cepas individuales dentro de cada especie.
El empleo de ATB para cada antibiograma se debe decidir en función de : la especie aislada, de los ATB disponibles en la institución y del foco de la infección.

CONCEPTO DE ANTIBIOGRAMA :
Conjunto de procedimientos que permiten determinar la sensibilidad in vitro de un microorganismo ante un determinado ATB.
Las pruebas de sensibilidad o susceptibilidad antimicrobianas que se utilizan para determinar la actividad de un ATB frente a una cepa en particular, son principalmente de 2 tipos :
1º) DILUCIÓN EN CALDO
Puede realizarse en medios de cultivos líquidos o sólidos.
Es un método cuantitativo que sirve para determinar la sensibilidad y resistencia de las bacterias.
Consiste en determinar el crecimiento de una bacteria en presencia de concentraciones decrecientes de ATB.
Este método permite determinar la CIM (concentración Inhibitoria mínima) y la CBM (concentración bactericida mínima).
Para determinar la CIM se utilizan una serie de tubos de ensayo en los cuales se va colocando sucesivamente el ATB a doble dilución; luego se siembra el microorganismo.
La CIM corresponderá al primer tubo de ensayo donde no se observe turbidez (la turbidez indica que existe crecimiento bacteriano).
Para determinar la CBM seleccionamos los tubos donde no observemos turbidez y sembramos su contenido sobre un medio de cultivo sólido, luego observaremos si hay o no desarrollo de colonias.
LA CBM corresponderá a aquella dilución donde no ha crecimiento bacteriano alguno.

2º) DIFUSIÓN EN DISCOS DE AGAR
Se realiza en medios sólidos y es la prueba más usada (de rutina) en los laboratorios.
Permite probar la eficacia de varios ATB al mismo tiempo.
Con este método determinamos la CIM .
Para ello se siembra, en un medio de cultivo sólido (Agar), una suspensión de microorganismos (108 UFC/ml ) y sobre esto se colocan discos o monodiscos de papel embebidos en concentraciones arbitrarias y conocidas de ATB. En el Agar húmedo , el ATB difunde desde los discos, con lo cual su concentración va decreciendo a partir del disco.
Luego se incuba adecuadamente (EJ. 24 – 48 HS) y a continuación observaremos los Halos de Inhibición del Crecimiento Bacteriano; inmediatamente medimos (en mm) el diámetro que poseen los halos de inhibición.
El Punto de corte de los halos , corresponde a un valor de CIM equivalente a la concentración de ATB que se alcanza en suero. Finalmente se compara la lectura realizada con tablas internacionales y se determina la sensibilidad o resistencia del microorganismo, clasificando a la cepa como Sensible (S) o Resistente y/o Intermedia (R) para ese ATB.

· CIM : (CONCENTRACION INHIBITORIA MINIMA)
Es la concentración más baja de un ATB capaz de inhibir el crecimiento de un microorganismo en condiciones estandarizadas.

CIM por E–Test : Consiste en aplicar sobre un medio de cultivo, donde se encuentra el microorganismo a ensayar, tiras plásticas que llevan incluidas un gradiente de concentración de un determinado ATB.
Luego se incuba adecuadamente y se observa la formación de una elipse de inhibición de crecimiento.
· Las Ventajas de este método frente al de CIM por Dilución :
a. Brinda un resultado de la CIM más exacto
b. Es en método menos laborioso
· Las Desventajas de CIM por E – Test frente al de CIM por Dilución :
a. No se puede determinar CBM
b. Es un método muy costoso
· CBM : (CONCENTRACION BACTERICIDA MINIMA)
Es la concentración más baja de un ATB capaz de destruir una porción predeterminada de un inóculo (en general el 99,9 %) en un tiempo determinado. Corresponde a la dilución donde no se observa crecimiento alguno de microorganismos.
Es importante que la concentración de ATB en el foco de infección supere por lo menos 10 veces la CBM.
Las situaciones clásicas que requieren realizar una CBM son :

· Infecciones en pacientes neutropénicos severos.
· Meningitis
· Endocarditis
· Osteomielitis
Como guía para seleccionar la dosis adecuada a ser administrada, puede utilizarse la medición de la concentración de ATB en el suero del paciente; para lo cual se toma una muestra de suero del paciente (bajo tratamiento ATB) antes de la administración de una nueva dosis endovenosa (en el valle de la curva de concentración) y luego se toma otra muestra al terminar la infusión endovenosa (en el pico de la curva de concentración).
Esto permite determinar el PIS y el PBS para monitorear y eventualmente corregir la dosificación del ATB empleado.
· PIS : (PODER INHIBITORIO DEL SUERO) Es la mayor dilución de un ATB en el suero del paciente, capaz de inhibir el desarrollo visible de un microorganismo.
· PBS : (PODER BACTERICIDA DEL SUERO) Es la mayor dilución de un ATB en el suero del paciente, capaz de matar al inóculo en un 99,9 %

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Laboratorio de Análisis Clínicos en Huelva

Hematología, Bioquímica, Estudios de coagulación, Estudios de orina y microbiología, Marcadores tumorales, Serologías, Fármacos, Autoinmunidad, Estudio de vitaminas, Análisis de sangre.